Development of methods for the consistent production of transferable embryos from oocytes collected from Mediterranean donors at prepubertal ages.

Il y a une demande croissante pour les produits laitiers de bufflonne qui ne peut être satisfaite en raison du nombre limité de femelles à haute productivité laitière disponibles au Canada. Une des principales limitations pour augmenter les troupeaux est le long temps nécessaire avant que ces animaux atteignent la maturité sexuelle. Ce projet vise la mise au point de méthodes efficaces de production de descendants de buffle méditerranéen à l’âge prépubère (âgés de 2 à 8 mois), en utilisant des techniques de production d'embryons in vitro. Même si les follicules se développent à l'âge prépubère, c’est connu que la compétence au développement embryonnaire des ovocytes prélevés chez les femelles prépubères est réduite par rapport aux femelles adultes. La compétence ovocytaire est acquise au cours des dernières étapes du développement du follicule en dépendance des interactions complexes entre l'ovocyte et les cellules somatiques du follicule (cellules de la granulosa), ce qui implique des facteurs endocriniens, paracrines et autocrines qui régulent ces interactions. Nous proposons que la compétence développementale des ovocytes récupérés à partir des buffles peut être améliorée si des conditions adéquates sont créées pour compenser le fait que l'axe hypothalamus-hypophyse-ovaire prépubère n'est pas totalement fonctionnel et promouvoir leur croissance et progrès vers la maturation. Par conséquent, notre premier objectif sera de créer un environnement optimisé pour l’acquisition de la compétence des ovocytes pendant la croissance des follicules en utilisant des régimes de stimulation hormonale stratégiques pour maximiser la maturation cytoplasmique avant la collecte des ovocytes. Deuxièmement, nous développerons des conditions de maturation in vitro (MIV) adaptées aux besoins spécifiques des ovocytes d’animaux prépubères pour améliorer la maturation cytoplasmique, la reprise de la méiose et la capacité pour bien réguler le processus de fécondation en réduisant le taux de polyspermie. Pour cela, le milieu IVM sera supplémenté avec des composés qui stimulent les interactions ovocytes-cellules granulosa et l'acquisition de la compétence des ovocytes, incluant des cytokines et des facteurs de croissance. Troisièmement, nous testerons l'efficacité de l'injection intracytoplasmique de spermatozoïdes (ICSI) comme alternative à la fécondation in vitro (FIV) pour prévenir la fécondation anormale. Finalement, pour faciliter la mise en oeuvre et utilisation de la technologie au niveau commercial, des protocoles pour la congélation des embryons seront optimisés. Celapermettras aux producteurs de produire et stocker des embryons tout au long de l'année afin d’être implantés dans des receveuses au moment de l'année favorisant la production de lait en raison des demandes du marché.